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一、原理
在中【zhōng】性条【tiáo】件下用过硫酸钾【jiǎ】使式样消解【jiě】，将式样【yàng】所含【hán】磷全部氧【yǎng】化为正磷酸盐，在【zài】酸性介质中，正磷酸盐与【yǔ】钼酸【suān】铵反映，在锑盐存在下，生【shēng】成磷钼【mù】杂多酸，立即【jí】被抗坏血酸还原，生【shēng】成蓝【lán】色络合物。
二、所需试剂
1、过硫酸钾，50g/L，5g过硫酸钾，纯水定容100ml。
2、抗坏血【xuè】酸【suān】，100g/L，10g抗坏血酸，纯水定容100ml。
3、硫酸，体积比1：1，150ml纯【chún】水：150ml浓【nóng】硫酸，体积300ml（硫【liú】酸配制【zhì】时注意要【yào】将硫酸缓缓【huǎn】倒入水中，切勿【wù】将【jiāng】水倒入硫酸中，避免发生危险【xiǎn】，混合使用有水冷却）。
4、钼酸盐【yán】溶液，13g钼酸铵，纯【chún】水【shuǐ】定容100ml，0.35酒石酸锑钾纯水定容100ml，
不断【duàn】搅拌先将钼酸铵溶液缓缓倒入300ml（3试剂）硫【liú】酸溶【róng】液中，然后加入【rù】配置好【hǎo】的【de】酒石【shí】酸锑钾溶液缓【huǎn】和均匀【yún】。
5、浊度【dù】色度补【bǔ】偿液，纯【chún】水【shuǐ】：浓【nóng】硫酸：抗坏【huài】血酸溶液（2试剂）=1:1:1，体积比。
（式样【yàng】浑浊时，多做一个空白式样（所取【qǔ】水样【yàng】，非【fēi】空白用纯水）加入此补【bǔ】偿液，加【jiā】入过硫【liú】酸钾与其【qí】他式样【yàng】一同消解，不加抗坏血【xuè】酸及钼酸盐溶【róng】液显【xiǎn】色）。
三、试样制备
1、取25ml所【suǒ】采水样，于50ml比【bǐ】色管中，共【gòng】计两组，含一【yī】个平行样，取纯水【shuǐ】25ml做空白样，取7.5ml磷标准使用溶液（2ug/ml），定容至【zhì】25ml，做标曲中间校核式【shì】样，共计4组式样【yàng】，若有【yǒu】多家式样同【tóng】时分析，只增【zēng】加平行【háng】样及式【shì】样，即每【měi】家增【zēng】加两组式样，不【bú】增加空白式样和标曲中间校【xiào】核式【shì】样。
2、含【hán】浊【zhuó】度补偿液式样的准备，针对浑浊的水样，即多增加一个采集式样，加【jiā】过【guò】硫酸【suān】钾【jiǎ】消解，然后加入【rù】色度补【bǔ】偿液，不加【jiā】抗坏血酸和钼【mù】酸盐溶液进行显色。
四、式样消解
所有【yǒu】制备好的式样中【zhōng】（含【hán】空白式样及色度补偿式样【yàng】），都加入4ml过硫酸钾溶液（50g/L）,用布和线将比色管的玻璃塞扎紧，至于高压【yā】蒸汽锅中加热，蒸汽【qì】锅压力为0.11mpa，温度120℃左【zuǒ】右，消解30分【fèn】钟【zhōng】，然后取出，冷却至【zhì】室温【wēn】，制得消【xiāo】解液。
五、显色
在消解液中加入1ml抗坏血酸【suān】（100g/L），混合均匀，30秒后加入2ml钼酸铵溶液，混合均匀，静置【zhì】15分钟。（添【tiān】加【jiā】过浊度补【bǔ】偿液的式【shì】样不添加【jiā】抗坏血【xuè】酸溶【róng】液和钼【mù】酸铵【ǎn】溶液，添【tiān】加3ml浊度补【bǔ】偿液）。
六、分光光度测试
光程【chéng】30mm比色皿，700nm波长，以纯水做参比（既以纯【chún】水校准分管光度计的透光率），分【fèn】别【bié】测【cè】定式【shì】样【yàng】中的【de】吸【xī】光度，然后扣除【chú】空白【bái】式样的吸光【guāng】度。添加浊度补偿的式【shì】样，同样测试吸光度，用同【tóng】批次【cì】显色式样吸光度扣除浊度【dù】补偿【cháng】吸光度，再扣除空白式样吸光【guāng】度。
七、标准曲线制作
取【qǔ】总磷标准溶液（1mg/mL）1ml，纯水定容【róng】至500ml，配制成2ug/ml的标准使用液，取7支50ml具塞比色管，分别【bié】加【jiā】入标准使用液，0ml，0.5ml，1ml，3ml，5ml，10ml，15ml，纯水定容【róng】至【zhì】25ml，重复【fù】第四、第【dì】五【wǔ】，第【dì】六部分【fèn】，测【cè】得吸光度，然后用excel表格【gé】，绘制【zhì】出标准曲线，相关系数在0.9990以上。
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